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畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量測(cè)定方法 GB/T 14931.1-94

2008-12-19 [3648]

 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量測(cè)定方法 GB/T 14931.1-94
(
液相色譜法)
Method for determination of oxytetracyline tetracyline and
chlortetracycline residues in meat (HPLC)
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1
 主題內(nèi)容與適用范圍
  本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量的檢測(cè)方法。
  本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種食用畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量的測(cè)定。zui低檢出濃
度為:0.15,0.20, 0.65mg/kg。
2
 原理
  樣品經(jīng)提取,微孔濾膜過濾后直接進(jìn)樣,用反相色譜分離,紫外檢測(cè)器檢測(cè),與標(biāo)準(zhǔn)
比較定量,出峰順序?yàn)橥撩顾?、四環(huán)素、金霉素。標(biāo)準(zhǔn)加法定量。
3
 試劑
3.1
 乙腈(分析純)
3.2
 0.01 mol/L磷酸二氫鈉溶液:稱取1.56 g(±0.01g)磷酸二氫鈉(NaH2PH4.2H2O)溶于
蒸餾水中,定容到100 mL,經(jīng)微孔濾膜(0.45 μm)過濾,備用。
3.3
 土霉素(OTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取土霉素0.0100g(±0.0001g),用0.1mol/L鹽酸溶液每毫
升含土霉素1mg。
3.4
 四環(huán)素(TC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取四環(huán)素0.0100g(±0.001g),用0.01 mol/L鹽酸溶液溶解
并定容10.00 mL,此溶液每毫升含四環(huán)素1mg。
3.5
 金霉素(CTC)標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取金霉素0.0100g(±0.0001g),溶于蒸餾水并定容成10.00
mL
,此溶液每毫升含金霉素1mg。
  以上標(biāo)準(zhǔn)品均按1000單位/mg折算。3.33.5溶液應(yīng)于4以下保存,可使用1周。
3.6
 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:取3.3、3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.00 mL,取3.5標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00 mL,置于10mL
容量瓶中,加蒸餾水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、四環(huán)素各0.1mg,金霉素0.2mg,臨
時(shí)現(xiàn)配。
3.7
 5%高氯酸溶液。
4
 儀器
4.1
 液相色譜儀(HPLC):具紫外檢測(cè)器。
5
 色譜條件
5.1
 柱:ODS-C18 (5 μm) 6.2mm×15 cm。
5.2
 檢測(cè)波長(zhǎng):355 nm
5.3
 靈敏度:0.002 AUFS。
5.4
 柱溫:室溫。
5.5
 流速:1.0mL/min。
5.6
 進(jìn)樣量:10 μL
5.7
 流動(dòng)相:乙腈/0.01 mol/L磷酸二氫鈉溶液(30(V/V)硝酸溶液調(diào)節(jié)pH2.5),35:65
(V/V)
,使用前用超聲波脫氣10 min
6
 操作方法
6.1
 樣品測(cè)定:稱取5.00 g(±0.01 g)切碎的肉樣(5 mm),置于50 mL錐形燒瓶中,加
5%高氯酸25.0mL,于振蕩器上振蕩提取10 min,移入到離心管中,以2000 r/min離心
3min,
取上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾,取溶液10μL進(jìn)樣, 記錄峰高,從工作曲線上查得含量。
6.2
 工作曲線,分別稱取7份切碎的肉樣,每份5.00 g(±0.01 g),分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)溶
0、25、50、100、150、200250 μL(含土霉素、四環(huán)素各為0、2.55.0、10.0、15.0
、20.0、25.0 μg, 含金霉素0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0 μg), 6.1方法操
作、以峰高為縱坐標(biāo), 以抗生素含量為橫坐標(biāo), 繪制工作曲線。

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